各类标本采集注意事项:1.血液和骨髓标本1)最佳采集时间为:首次抗生素使用前或更换前,如有间隔性发热者应在下次发热前1-2小时内从不同部位或不同时间(相隔1小时)取样本送检,24小时内一般不超过3次,成人每次10-20ml。应该在不同部位抽2(1瓶需氧+1瓶厌氧为1套)4瓶,每瓶抽静脉血8-10ml2)如疑似以心内膜炎患者,可连续做3次培养,若已用抗生素治疗的患者,可连续三天,每天2次培养。3)血液标本应尽可能抽取患者动、静脉血管中血液,如标本自留置管、中心静脉导管时,请在申请单上注明。不建议抽取动脉血送血培养4)血管内导管尖端培养标本留取方法a)用酒精清洁导管周围皮肤。b)无菌手续移动导管,剪取尖端末段5cm,直接置人无菌试管中。c)立即运送到细菌室,为防止干燥,常规培养不超过15min,4℃保存不超过2h。5)结果解释医生应有:a)在血液标本的采集、接种、运送过程中有被污染的可能的概念,尤其在静脉穿刺术中,皮肤消毒应严格按规程操作,应保证有足够的消毒时间(70%酒精擦拭穿剌部位,待30秒,碘酊消毒30秒或碘伏60秒,再用70%酒精脱碘,对碘过敏者只能用70%酒精消毒60秒),在此标准操作下,污染率还有2%-3%的可能,如果消毒时间不够,污染机率增大。b)从静脉导管采血,污染机率增大。c)在鉴定静脉导管为菌血症来源时,应同时做血液培养和血管内导管尖端培养,或抽取软组织感染处新鲜脓性标本培养,只有同次血液标本培养和导管尖端培养结果是同种细菌,才能解释该导管是患者菌血症的源头。脑脊液标本采集后15分钟内送到实验室,CSF采集后,置于无菌试管中,15min内运送实验室,绝不可冷藏。每种检验需要最小量:细菌培养≥1ml,真菌≥2ml,抗酸杆菌≥2ml。3.尿标本的采集、运送和处理正常人体膀胱中的尿液是无菌的,从膀胱穿刺取出的尿也应无细菌;尿液经尿道排出时,受到尿道中细菌的污染而混有细菌,取经尿道排出的中段尿,细菌数不超过cfu/ml。患有泌尿系感染时,尿中的菌数高于—cfu/ml。尿标本采集时应注意:1)中段尿采集清洁外阴及尿道口周围,自然排尿,让尿流不间停,截留中段尿,置于无菌大口容器或尿运送杯中,不少于1ml。2)直接插导管采集尿标本一般插入导管后先让尿流弃15ml再留取培养标本。请尽量不用此法采集标本,因它极容易将尿道细菌群引入膀胱,增加医源性感染危险。3)滞留导管集尿用70%酒精消毒导管口用针筒抽取5—10m1尿,置于无菌容器中送实验室,滞留导管会使膀胱带有细菌,尽可能不采用。4.下呼吸道标本下呼吸道标本可以是痰、支气管肺泡灌洗吸出液、支气管冲洗液或刷子、肺穿刺或活组织等。如病人自行咳痰困难,医护人员应先行口腔清洁后,再用无菌棉拭子留取,放有少量培养液的标本管中,立刻送检。其它类型的标本,直接置标本杯或管中送检,原则是避免正常菌群污染、保湿和及时。痰标本,应在早晨上班后,于医护人员指导下留取,告诉病人先用冷开水漱口清洗咽喉,直接将痰咳出,吐于无菌广口标本杯中,常规培养≤1h送到实验室立即接种,请不要将痰吐到卫生纸上,再置标本杯中送检。如病人自行咳痰困难,医护人员应先行口腔清洁后,再用无菌棉拭子留取,放有少量培养液的标本管中,立刻送检。其它类型的标本,直接置标本杯或管中送检,原则是避免正常菌群污染、保湿和及时。5.粪便标本1)常规性培养直接留置粪便标本于无菌的广口标本杯中,直肠拭子:用无菌拭子插人肛门2—4cm,在肛门括约肌处柔和地旋转拭子,可在拭子上明显见到粪便,放入无菌管运送。患者不能自行采集。除婴儿患者外,不推荐用拭子做常规性病原菌培养。2)常规性检测主要是针对沙门、志贺菌,如为水样腹泻时,医生还应该考虑弧菌感染;在婴幼儿或老年病人出现蛋花样、液状、脓性、粘液性、血性便时,还应考虑致病性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和空肠弯曲菌感染;长期应用抗生素后出现黄色、伪膜性粘液便时,还应考虑艰难梭菌感染,出现绿色、海水样或糊状便时,要考虑葡萄球菌感染,此外,真菌感染也常发生在大量使用抗生素后;遇到上述情况时,除做常规培养外还要加做相关菌培养,医生可勾取相应项目/或开两张单,送一份标本即可。6.眼、耳、鼻、喉标本1)耳、鼻、咽部的细菌感染病原菌来源于口腔。口腔中既有需氧菌也有厌氧菌,故其周围组织器官的感染不仅要考虑是需氧菌,也须检查厌氧菌。2)眼结膜标本预先沾湿拭子,在结膜上滚动采集标本。标本在15min内送达实验室。眼角膜标本在麻醉下采集,用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑,可直接接种在培养基平板上培养或立即送细菌室。3)口腔咽部标本先用一个拭子揩去溃疡或创面浅表分泌物,第二个拭子采集溃疡边缘或底部,放无菌含小量液体培养的标本管中送检,常规培养≤1h运送实验室。4)患有外耳炎患者,需要深部耳拭子,因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝织炎。5)鼻标本留取用一根无菌棉拭子,伸进一侧鼻孔约2.5cm,与鼻黏膜接触,轻轻地旋转拭子,蘸取黏膜上分泌物,缓慢抽出,置于运送培养基或将拭子直接置有小量液体培养基的标本管中送检。7.脓液标本1)开放脓肿用无菌盐水或70%乙醇擦去表面渗出物,用拭子深入溃疡基底部或边缘部,采集二个拭子,分别做培养和革兰染色。2)闭锁脓肿用注射器抽取,刺人无菌橡皮塞中送检。8.无菌体液标本1)无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、心包液、腹膜穿刺液和滑膜液,正常的穿刺液是无菌的,在感染的情况下,只要检出细菌,通常都可视为病原菌。2)留取标本时,如不是直接注入培养瓶时,应防止体液凝固,请在无菌容器内预先加入灭菌肝素0.5mg(可抗凝5m1标本)再注入各种穿刺液,轻轻混合。3)须同时做需氧和厌氧菌培养,根据临床提示的要求增加结核及真菌培养,无菌体液含细菌数量较少,因此,必须做增菌培养。如标本外观非脓样,可加大接种量。4)无菌体液标本抽取后,可直接用无菌操作方法注入相应的血增菌瓶内,做厌氧培养时,注入前一定要将注射器中的空气排净。9.生殖系统标本1)阴道、子宫颈陷凹、子宫内膜、生殖道创伤、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌物应由医师采集,请收集于有小量液体培养基的无菌试管内中送检。2)淋病奈瑟菌检查时,不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深取样并立刻送检,要避免阴道分泌物污染拭子。3)厌氧培养时,应置Cary—B1air系统管中及时送检,尽量减少在空气中的暴露时间。
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